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前言1983年，Smith等首次报道利用苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒在草地贪夜蛾细胞系中成功地表达了人B一千扰索。此后，杆状病毒表达载体系统研究作为一个新的研究领域迅速发展.目前，利用杆状病毒表达的外源基因已经超过500种，其来源遍及动物、植物、真菌、细菌和病毒。杆状病毒已被证明是最有效的真核基因表达载体。这种新型的基因表达载体系统无论是作为生产系统在疫苗、酶和诊断试剂以及其它生物活性物质的制备方面，还是作为研究工具对于基因表达调控、蛋白质与蛋白质、蛋白质与核酸的相互作用以及蛋白质的结构与功能方面的研究工作都具有重要的应用价值。在短短十几年时间里，利用杆状病毒表达外源基因的技术得到了迅速发展。l987年Summers和Smith编写了第一本介绍利用杆状病毒在昆虫细胞中表达外源基因的操作方法的小册子“A·nual of methods for baculovirus vectors and insect cell cultureprocedures'”,l992年两本全面介绍杆状病毒表达载体系统及其应用技术的著作“Baculovirus expression system.A laboratoryguide”(King and Possee)和“Baculovirus expression system.Alaboratory nual'”(O'Reilly et al..)面世。这几本书对于杆状病毒表达载体系统的推广应用及其本身的技术发展发挥了推动和指导作用。最近几年，杆状病毒表达载体系统的研究工作又取得了许多重要成就，主要体现在以下几个方面：其一，新建立的构建重杆状病毒表达载体系统组杆状病毒的方法大大简化了重组病毒筛选和纯化的步骤。其二，新一代杆状病毒表达载体不仅能在昆虫细胞中高效表达外源目的基因而且能够使外源基因产物被细胞分泌和易于纯化。其三，以TN5B1细胞系为代表的新细胞系作为杆状病毒表达载体的基因表达受体系统其生产外源基因表达产物的能力大大优于传统的Sf细胞系。其四，利用昆虫细胞大规模培养生产重组蛋白的技术条件已日渐成熟。其五，杆状病毒分子生物学的研究工作取得了重大进展。I994年，Ayers等发表了AcMNPV基因组全序列分析结果；目前已经鉴定出8个杆状病毒DNA复制原点和18个晚期表达因子以及其它一些重要的功能基因。杆状病毒分子生物学的研究成果必然会使杆状病毒表达载体得到进一步改良和完善。这本书共分10章。其中，前两章讨论杆状病毒分子生物学特征和利用杆状病毒作为基因表达载体的原理；三、四章讨论转移载体和亲本病毒以及在构建重组杆状病毒时选择转移载体和亲本病毒的策略；五、六章介绍昆虫细胞培养和利用昆虫细胞培养滴定和纯化杆状病毒的方法；七、八、九章介绍重组杆状病毒构建、筛选和鉴定的操作方法；最后一章简要介绍利用昆虫细胞培养和虫体生产重组蛋白以及昆虫饲养的方法。彭建新副教授参加编写了第二章。本书介绍的技术方法大部分取自以往发表的文献资料，其中大部分被作者的同事和作者本人采用过；有些方法是在前人的工作基础上根据自己的工作经验修改而成的。在编写本书的过程中，作者力求反应杆状病毒表达载体系统研究领域的最新成就。由于作者本人的理论水平和实际工作经验的限制，书中一定会有许多不足或错误的地方，欢迎读者提出批评和修改意见。本书在编写过程中得到了我的导师陈曲侯教授和中山大学龙綮新教授的指导。两位老师审阅了全部书稿并提出了许多修改意
